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摘要 采用紫外-可见吸收光谱、荧光光谱和圆二色光谱并结合分子模拟技术,考察了槲皮素与胰蛋白酶(TRY)的作用机制及槲皮素的抗氧化活性。研究发现,槲皮素的加入可以猝灭TRY的内源性荧光,两者有一个结合位点,298K时结合常数为8.24×104 L·mol-1,且疏水作用力是驱动槲皮素与TRY结合的主要作用力。槲皮素能够诱导TRY的α-螺旋和无规则卷曲比率上升,而β-折叠和β-转角比率下降,导致二级结构发生变化。分子模拟结果显示,槲皮素分子的苯环结合到TRY疏水腔中,与Leu155,Pro28,Pro198,Val200,Ser 202和Cys157等主要氨基酸发生作用。抗氧化性实验表明,槲皮素对DPPH和羟基自由基的清除能力比维生素C强,而TRY对槲皮素清除DPPH自由基的能力产生抑制作用。
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关键词 :
槲皮素,
胰蛋白酶,
荧光猝灭,
分子模拟,
自由基清除
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基金资助:国家自然科学基金项目(31460422,31060210); 江西省自然科学基金项目(20171BAB204029,20143ACB20006); 江西省教育厅科技项目(GJJ150187); 食品科学与技术国家重点实验室目标导向课题(SKLF-ZZA-201612); |
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