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| 生物信息学方法筛选结肠癌相关lncRNA-miRNA网络及其细胞水平的功能验证 |
| 潘希望邱模竞郑林林杨新博徐晨李太原胡家萍 |
| 南昌大学第一附属医院普外科 |
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摘要 目的 筛选结肠癌差异表达的lncRNA和miRNA,探讨其与结肠癌预后的关系及相关生物学功能。方法从TCGA数据库收集结肠癌患者的lncRNA和miRNA表达谱数据及临床资料，利用R软件筛选差异表达的lncRNA和miRNA;单因素Cox回归分析与预后显著相关的差异表达lncRNA和miRNA;miRNet数据库构建预后相关的lncRNA-miRNA网络，利用mirPath v.3软件对其进行功能富集分析；R软件构建预后风险模型并对其进行验证。采用CCK-8实验、划痕实验、流式细胞术及qPCR评估敲减TSPEAR-AS2对人结肠癌HCT116细胞增殖、迁移、凋亡及下游miRNA表达的影响。结果 筛选出结肠癌组织中1823个差异表达的lncRNA和524个差异表达的miRNA;发现158个lncRNA和31个miRNA与结肠癌的预后相关；构建由8个lncRNA和14个miRNA组成的lncRNA-miRNA网络；GO和KEGG富集分析显示，lncRNA-miRNA网络主要参与肿瘤相关的生物学功能及通路；鉴定出11个能有效评价结肠癌预后特征的关键基因，由这11个关键基因构建的预后风险模型中高风险组生存时间显著短于低风险组(P<0.001),预测1、3和5年生存的AUC分别为0.70、0.74和0.71。敲减TSPEAR-AS2可抑制HCT116细胞增殖、迁移、促进细胞凋亡，并下调hsa-mir-4731-5p和hsa-mir-342-3p的表达。结论 成功筛选结肠癌相关lncRNA-miRNA网络，并由此构建的预后风险模型具有良好的预测效能。TSPEAR-AS2参与调控结肠癌细胞的增殖、迁移、凋亡以及下游miRNA表达。
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| 关键词 ：
结肠癌,
长链非编码RNA,
微小RNA,
生物信息学,
预后模型,
TSPEAR-AS2
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