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摘要 观察miR-185-5p对肺癌细胞迁移、侵袭的影响，分析酮还原酶1家族成员C1(AKR1C1)在miR-185-5p调控肺癌细胞迁移和侵袭中的作用。方法 RT-qPCR检测miR-185-5p在组织样本(人肺癌及对应癌旁组织)、细胞系(人肺上皮细胞系BEAS-2B和肺癌细胞系A549、H460)中的表达。按照处理方式不同将A549细胞分为miR-NC组(转染miR-NC)、miR-185-5p组(转染miR-185-5p)、miR-185-5p+pcDNA组(共转染miR-185-5p和pcDNA)、miR-185-5p+pcDNA-AKR1C1组(共转染miR-185-5p和pcDNA-AKR1C1);Transwell和划痕实验检测各组A549细胞迁移和侵袭；在线预测网站Starbase预测miR-185-5p的下游靶基因；双荧光素酶报告基因实验检测A549细胞荧光素酶活性；蛋白免疫印迹实验检测各组A549细胞中AKR1C1、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9的蛋白表达。结果 与癌旁组织比较，肺癌组织中miR-185-5p的表达显著降低(P<0.001);与BEAS-2B细胞比较，A549和H460细胞中miR-185-5p的表达亦显著降低(均P<0.001);与miR-NC组比较，miR-185-5p组A549细胞的miR-185-5p表达显著升高，迁移和侵袭细胞数及划痕愈合率均显著降低(均P<0.001),MMP-2、MMP-9蛋白的表达均显著降低(均P<0.001)。Starbase预测显示miR-185-5p与AKR1C1之间存在连续的互补结合序列；与miR-NC组比较，miR-185-5p组AKR1C1-WT细胞的荧光素活性显著降低(P<0.05)。与miR-NC组比较，miR-185-5p组细胞中AKR1C1蛋白表达显著降低(P<0.05);与anti-miR-NC组比较，anti-miR-185-5p组细胞中AKR1C1蛋白表达显著升高(P<0.05)。与癌旁组织比较，肺癌组织中AKR1C1 mRNA和蛋白表达均显著升高(均P<0.001);与BEAS-2B细胞比较，A549细胞中AKR1C1 mRNA和蛋白表达均显著升高(均P<0.001)。与miR-185-5p+pcDNA组比较，miR-185-5p+pcDNA-AKR1C1组miR-185-5p表达显著降低(P<0.001)、迁移和侵袭细胞数及划痕愈合率均显著升高(均P<0.001)、MMP-2和MMP-9的蛋白表达均显著升高(均P<0.001)。结论 miR-185-5p可抑制肺癌细胞的迁移、侵袭，该作用与miR-185-5p靶向负性调控AKR1C1有关。
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| 关键词 ：
miR-185-5p,
醛酮还原酶1家族成员C1,
肺癌,
迁移,
侵袭
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| 基金资助:陕西省医学科学研究重点课题计划(2018JM3272)； |
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