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| miR-219-5p对人肾癌细胞增殖和迁移、侵袭的影响及其作用机制 |
| 王晓燕冯景见何英霞李康李鑫 |
| 石家庄市人民医院肿瘤科五病区 |
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摘要 目的 探讨微小RNA-219-5p(miR-219-5p)对人肾癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响及其作用机制。方法 采用实时荧光定量PCR(qPCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测miR-219-5p和NIMA相关激酶6(NEK6)蛋白在肾癌组织和肾癌细胞786-O、ACHN中的表达。建立过表达miR-219-5p的细胞，观察其对肾癌细胞786-O、ACHN增殖、迁移和侵袭的影响。生物信息学预测结合双荧光素酶报告实验分析miR-219-5p与NEK6的靶向关系。在786-O、ACHN细胞中转染si-NEK6,噻唑蓝(MTT)和细胞克隆实验检测细胞存活和克隆数，Transwell检测细胞迁移和侵袭，Western blot检测细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、P21、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、NEK6蛋白表达。共转染miR-219-5p和pcDNA3.1-NEK6,观察过表达NEK6对miR-219-5p诱导的786-O和ACHN细胞增殖、迁移和侵袭的影响。结果 与癌旁组织或肾上皮细胞比较，肾癌组织或肾癌细胞786-O、ACHN中miR-219-5p表达量明显减少，NEK6蛋白表达量显著增加(P<0.05)。过表达miR-219-5p明显减低786-O、ACHN细胞存活率、克隆数、迁移细胞数、侵袭细胞数、Cyclin D1、MMP-2蛋白表达量，提高P21、E-cadherin蛋白水平(P<0.05)。miR-219-5p靶向调控NEK6表达。抑制NEK6明显减少786-O、ACHN细胞中NEK6、Cyclin D1、MMP-2蛋白表达量、细胞存活率、克隆数、迁移细胞数和侵袭细胞数，显著提高P21、E-cadherin蛋白水平(P<0.05)。过表达NEK6逆转了miR-219-5p对786-O、ACHN细胞增殖、迁移、侵袭、Cyclin D1、MMP-2蛋白表达的抑制作用，以及逆转了其对P21、E-cadherin蛋白表达的促进作用。结论 miR-219-5p通过靶向调控NEK6表达抑制肾癌细胞的增殖、迁移和侵袭。
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| 关键词 ：
miR-219-5p,
NIMA相关激酶6,
肾癌,
增殖,
迁移,
侵袭,
作用机制
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| 基金资助:河北省石家庄市卫健委计划项目(201460853)； |
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