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| 非小细胞肺癌GATA4启动子甲基化检测及其对细胞增殖和凋亡的影响 |
| 李源 党海舟 |
| 汉中市三二0一医院呼吸科 空军军医大学第二附属医院胸腔外科 |
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摘要 目的探讨GATA4启动子甲基化对非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer, NSCLC）细胞系A549的增殖和凋亡的影响。方法采用甲基化特异性PCR（MSP）法检测人正常肺上皮细胞系BEAS-2B和人NSCLC细胞系A549中GATA4启动子的DNA甲基化水平;采用Real-time PCR检测细胞GATA4的mRNA水平。采用DNA甲基化抑制剂5-Aza-2′deoxycytidine处理细胞,观察细胞GATA4 mRNA的表达水平;采用CCK-8检测细胞增殖率;采用Western blot检测细胞增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen, PCNA）、cleaved-caspase 3和caspase 3;用流式细胞术检测细胞凋亡。结果 A549细胞GATA4启动子甲基化率显著高于BEAS-2B细胞[（3.383±0.614）%比（35.53±1.89）%,t=16.14,P<0.01];A549细胞GATA4 mRNA水平明显低于BEAS-2B细胞（1.000±0.000比0.358±0.027,t=23.98,P<0.01）;抑制A549细胞GATA4的DNA甲基化后,其GATA4 mRNA水平升高（1.000±0.000比3.100±0.188,t=11.17,P<0.01）;DNA甲基化抑制剂5-Aza-2′deoxycytidine抑制A549细胞的增殖,且PCNA的表达降低（0.998±0.003比0.721±0.020,t=13.74,P<0.01）、cleaved-caspase 3/caspase 3的比值增高（0.998±0.003比1.682±0.051,t=13.50,P<0.01）、细胞的凋亡率增加[（6.222±0.399）%比（14.990±0.690）%,t=11.00,P<0.01]。结论 NSCLCGATA4启动子甲基化水平增高,导致GATA4 mRNA表达降低,诱导细胞增殖并抑制其凋亡。
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| 关键词 ：
非小细胞肺癌,
GATA4启动子,
DNA甲基化,
细胞增殖,
细胞凋亡,
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