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| 补肾强精颗粒通过线粒体自噬改善弱精子症大鼠的作用机制 |
| 张嘉伊 傅靖雯 周玉良 姚文亮 |
| 江西中医药大学研究生院临床医学系 江西中医药大学附属生殖医院生殖男科 |
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摘要 目的 探讨补肾强精颗粒(BQG)通过Pink 1/Parkin通路介导的线粒体自噬改善弱精子症(AZS)大鼠的作用机制。方法 将40只SD雄性大鼠随机分为5组:正常对照组(Control组)、模型组(MD组)、补肾强精颗粒低剂量组(BQG-LD组)、补肾强精颗粒高剂量组(BQG-HD组)和左卡尼汀口服液阳性对照组(LC组),每组8只。MD组、BQG-LD组、BQG-HD组、LC组大鼠给予雷公藤甲素(TP)制作AZS模型。BQG-LD组、BQG-HD组大鼠分别给予0.27 、0.54 g·mL-1 BQG灌胃,LC组大鼠给予3.12 mL·kg-1左卡尼汀灌胃,治疗28 d。采用苏木精-伊红染色(HE)和透射电镜(TEM)观察睾丸组织的病理学改变和线粒体自噬的超微结构改变;应用JC-1线粒体膜电位检测试剂盒和流式细胞仪检测线粒体膜电位水平的变化;采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定大鼠血清睾酮水平及睾丸组织中活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)含量;采用Western blotting及RT-qPCR检测Pink 1、Parkin、Beclin 1、LC 3-Ⅱ/LC 3-Ⅰ、P62的蛋白及mRNA表达水平;应用免疫荧光标记Pink 1、Parkin、TOMM 20和MDC定位。结果与MD组相比,BQG-LD组、BQG-HD组、LC组大鼠的精子质量、血清睾酮、线粒体膜电位水平、SOD和CAT水平均显著升高(P<0.05),ROS和MDA水平均显著下降(P<0.05),PINK 1、Parkin、Beclinc、LC 3-II/LC 3-I和P62等自噬相关指标的mRNA和蛋白表达均显著降低(P<0.05),Pink 1、Parkin、TOMM20、MDC的免疫荧光标记显著减少(P<0.05),睾丸组织的病理结构及超微结构均得到改善。结论 BQG能有效改善AZS,并通过下调Pink 1、Parkin、Beclin 1、LC 3-Ⅱ/LC 3-Ⅰ和P62的表达水平,促进自噬通量,从而减轻睾丸线粒体过度自噬。
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| 关键词 :
线粒体自噬,
补肾强精颗粒,
Pink1/Parkin通路,
弱精症,
氧化应激,
动物,
实验,
大鼠
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| 基金资助:江西省中医药管理局重点项目(2020Z013);江西省中医药管理局一般项目(2024B0669); 江西中医药大学研究生创新专项资金项目(XJ-S202422); |
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