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DMU-212诱导凋亡及自噬抑制角膜新生血管形成 |
罗潇王庆刘珏伶熊健祝泽宇俞康徐静静程茌文俞益丰 |
南昌大学二附属医院眼科中心 |
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摘要 目的 探讨白藜芦醇类似物反式-3,4,5,4′-四甲基二苯乙烯(DMU-212)在抑制角膜新生血管(CNV)形成的过程中对细胞凋亡和自噬的影响。方法 选取人脐静脉内皮细胞(HUVEC)作为体外研究材料,随机将细胞分为6组,均使用10 ng·mL-1 VEGF进行诱导处理,并分别暴露于0、10、20、40、80、120μmol·L-1 DMU-212,用CCK-8法检测各组细胞增殖;分别通过划痕实验和管腔形成实验检测对照组(0μmol·L-1 DMU-212处理)和DMU-212组(40μmol·L-1 DMU-212处理)的细胞迁移能力和血管形成能力;通过蛋白免疫印迹实验检测2组凋亡和自噬相关蛋白表达水平;分别通过TUNEL实验和MDC实验检测2组细胞凋亡和自噬水平。结果 各DMU-212处理组与对照组相比,细胞增殖率总体呈现浓度依赖性抑制,差异显著(F=11.35,P<0.001)。与对照组相比,DMU-212组细胞迁移速率和管腔形成能力显著受到抑制(均P<0.01);DMU-212组cleaved caspase3、cleaved caspase9、Bax、Cyto-c、ATG7、LC3-Ⅱ和Beclin 1蛋白相对表达量显著升高(P<0.05或P<0.01),P62和Bcl2蛋白相对表达量显著降低(P<0.01);DMU-212组凋亡探针和自噬探针的荧光强度均显著增加(P<0.05和P<0.01)。结论 DMU-212可诱导HUVECs凋亡并提高自噬水平,从而抑制新生血管的形成。
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关键词 :
反式-3,
4,
5,
4′-四甲基二苯乙烯,
自噬,
凋亡,
角膜新生血管
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基金资助:江西省自然科学基金(20212ACB2060022); 江西省中医药科技计划项目(2019A1889); 江西省卫健委科技计划项目(202110043,202310521); |
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