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| P2X2嘌呤受体缺乏对糖尿病视网膜病变的保护作用 |
| 李晶 曾玉 黄佳斯 程翔 王刚强 黄德斌 |
| 长沙市第三医院检验科 空军军医大学西京医院检验科 长沙市第三医院内分泌科 |
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摘要 目的 探讨P2X2嘌呤受体在糖尿病视网膜病变过程中的变化及其缺乏对神经节细胞的保护作用。方法30只野生型（WT）和30只P2X2基因敲除（P2X2-/-）C57/Bl6雄性小鼠分为正常WT组、正常P2X2-/-组、糖尿病WT组和糖尿病P2X2-/-组，每组各15只。WT或P2X2-/-小鼠通过单次注射链脲佐菌素(160 mg·kg-1)诱发糖尿病。分别在血糖诱导前、STZ注射后1和8周，采用定量RT-PCR检测视网膜P2X2 mRNA表达，用免疫组织化学方法检测WT小鼠糖尿病视网膜病变过程中P2X2在视网膜的分布，用兔多克隆抗βⅢ微管蛋白免疫染色视网膜评估正常和糖尿病WT和P2X2-/-小鼠的视网膜神经节细胞（RGC）存活率。结果 P2X2主要位于视网膜神经节细胞层（GCL）、内核层（INL）和外核层（ONL）;与诱导前相比，正常WT组小鼠在各观察时点视网膜中P2X2 mRNA表达差异无统计学意义（P>0.05）。糖尿病WT组小鼠在STZ注射后1、8周视网膜中P2X2 mRNA表达显著高于诱导前和正常WT组（P<0.001）。糖尿病WT组与糖尿病P2X2-/-组小鼠的视网膜总厚度及外丛状层（OPL）、ONL、内丛状层（IPL）、INL的厚度差异无统计学意义（P>0.05）。兔多克隆抗βⅢ微管蛋白对全视网膜进行免疫染色结果显示，糖尿病显著降低了WT小鼠视网膜中RGC的总数（P<0.05）,但不影响P2X2-/-小鼠视网膜中RGC的总数。与糖尿病P2X2-/-组小鼠相比，糖尿病WT组小鼠视网膜中TLR4和IL-1β免疫反应性和视神经小胶质细胞显著增加（P<0.05）。结论 P2X2嘌呤受体在糖尿病早期视网膜和视神经炎性损伤中起作用，表明P2X2嘌呤受体可能是一个有吸引力的药物靶点。
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| 关键词 ：
P2X2嘌呤受体,
糖尿病视网膜病,
视网膜神经节细胞,
动物,
实验,
小鼠
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| 基金资助:湖南省卫生健康委科研计划项目(20201430)； |
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