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赭曲霉毒素A结构修饰物监测免疫亲和柱容量 |
江西科技师范大学生命科学学院 江西科技师范大学天然微生物药物研究江西省重点实验室 南昌大学化学化工学院 |
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摘要 为探索免疫亲和柱串联高效液相色谱(immunoaffinity column-high performance liquid chromatography,IAC-HPLC)监测IAC柱容量的方法,本研究利用赭曲霉毒素A(Ochratoxin A,OTA)与乙二胺发生缩合反应,纯化获得高纯度OTA结构修饰物(OTA-X),通过光谱、质谱对其进行了鉴定,以IAC的抗体建立了酶联免疫吸附法(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA),测得OTA与OTA-X在竞争抑制曲线的IC50值分别为0.71和9.97 ng·mL-1,表明OTA-X与抗体的亲和力低于OTA。以OTA-X作为IAC柱容量的示踪物,建立了IAC-HPLC方法,监测添加不同浓度的OTA-X和OTA在IAC的回收率。结果表明:在柱容量范围内,OTA的回收率大于80%,而OTA-X的回收率随着OTA的增加而降低,总结合量大于柱容量,说明OTA-X可以作为IAC柱容量的示踪物监测柱容量,且不影响OTA的检测结果,为提高OTA检测的准确度提供了新方法。
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关键词 :
免疫亲和柱,
柱容量,
赭曲霉毒素A,
结构修饰物,
高效液相色谱
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基金资助:国家自然科学基金资助项目(31960501); 江西省教育厅科技落地计划(KJLD14067); 江西省职业早期青年科技人才培养专项项目(20244BCE52251); |
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