目的 探究葡萄籽多酚（GSP）对人口腔鳞癌细胞（OSCC）增殖、迁移、周期及糖酵解的影响及机制。方法 使用3、6、12、24、48μg·mL-1的GSP处理口腔鳞癌细胞株（HN6及Cal27）。采用CCK8法检测细胞增殖，划痕实验检测细胞迁移，流式细胞术检测细胞周期，葡萄糖氧化酶法检测细胞上清中葡萄糖含量，比色法检测丙酮酸和乳酸含量，RT-qPCR法检测细胞增殖、迁移及周期相关基因表达水平。结果 GSP在6～48μg·mL-1范围内对HN6及Cal27细胞株的增殖和迁移均具有显著的抑制作用，且存在剂量依赖性（P <0.05或P <0.01）。GSP处理的HN6细胞被阻滞于G1期，而Cal27细胞则被阻滞于G2期。与对照组相比，GSP处理组能够显著降低OSCC细胞的葡萄糖摄取、丙酮酸和乳酸的产生（P <0.01）;GSP处理组肿瘤细胞增殖（MKi67、MYC、PCNA）、迁移（CDH2、Twist、Slug）和细胞周期（CyclinD1、CDK4、CDK6、CyclinB2、CDK1）等相关基因的表达水平显著降低（P <0.01）。结论 GSP能抑制OSCC细胞的增殖、迁移，其机制可能与糖酵解降低和细胞周期G1期或G2期阻滞相关。