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南方红豆杉水提物通过氧化应激和线粒体损伤影响口腔鳞癌细胞CAL27的增殖和凋亡 |
刘莉 童国勇 余周庆 朱彬 张宏谧 |
恩施土家族苗族自治州中心医院口腔诊疗中心 湖北民族大学附属民大医院口腔科 |
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摘要 目的 研究南方红豆杉水提物(AETC)对口腔鳞癌(OSCC)细胞CAL27增殖、凋亡的影响及机制。方法CCK-8法检测不同质量浓度AETC(0、0.125、0.250、0.500、1.000、2.000、4.000和6.000 mg·mL-1)处理CAL27细胞的存活率并筛选后续浓度;克隆形成实验检测细胞增殖;qRT-PCR检测增殖相关指标Ki67和p21 mRNA的表达;流式细胞术检测细胞凋亡;DCF染色法检测活性氧(ROS)含量;ELISA试剂盒检测氧化应激指标[超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和乳酸脱氢酶(LDH)]的水平;JC-1染色法评估线粒体膜电位变化;Western blot法检测增殖、凋亡和线粒体损伤相关蛋白(p21、Ki67、Caspase-3、Caspase-9、Bcl-2和Bax)的表达。结果 与0 mg·mL-1AETC组比较,CAL27细胞的存活率随着AETC质量浓度的增加而降低,后续选择0.250、0.500、1.000 mg·mL-1AETC;与0 mg·mL-1AETC组比较,0.500 mg·mL-1组和1.000 mg·mL-1组的AETC细胞克隆形成率显著降低、Ki67表达降低、p21表达增强、细胞凋亡率增加、活化Caspase-9和Caspase-3表达及Bax/Bcl-2增加、SOD水平降低、ROS、MDA和LDH水平增加、线粒体膜电位显著降低(均P<0.05)。结论 AETC可抑制CAL27细胞增殖,促进细胞凋亡,其机制可能与细胞氧化应激和线粒体损伤增加有关。
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关键词 :
南方红豆杉水提物,
口腔鳞癌,
增殖,
凋亡,
氧化应激,
线粒体损伤
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基金资助:2020年恩施州科技计划指导性项目(E20200016); |
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