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摘要 红曲菌(Monascus)是我国传统的发酵菌株,在发酵过程中会产生一种具有肾毒性的真菌毒素——桔霉素(Citrinin, CIT)。桔霉素的存在极大地限制了红曲制品的应用与发展。明确红曲菌合成CIT的机制,对于开发抑制CIT合成的方法具有十分重要的意义。小G蛋白Rab1可以介导调控丝状真菌中蛋白的转运,ctnE基因编码红曲菌AS3.4384中CIT合成基因簇中的脱氢酶。然而,目前尚不清楚Rab1蛋白是否参与了CtnE蛋白的转运。通过农杆菌介导转化的方法构建了AS3.4384::Rab1-GFP(绿色荧光蛋白,Green Fluorescent Protein)和AS3.4384::Rab1-GFP::ctnE-mCherry(红色荧光蛋白,monomeric cherry red fluorescent protein)两种红曲菌株,并通过荧光共定位确定了Rab1蛋白和CtnE蛋白在菌体中的分布情况。结果表明,CtnE-mCherry蛋白大多聚集于红曲菌丝体的顶端以及分生孢子中,并在菌丝体内呈均匀弥散状分布。Rab1蛋白和CtnE蛋白在红曲菌体内的分布位点基本一致,表明CIT的合成与囊泡转运密切相关。通过Rab1蛋白与CtnE蛋白的荧光共定位情况进一步解析了CIT合成位点。
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基金资助: 国家自然科学基金资助项目(31860435); |
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