|
|
橙色红曲菌Ku70基因缺失菌株的构建及功能分析 |
南昌大学食品科学与技术国家重点实验室 南昌大学中德联合研究院 南昌大学食品学院 |
|
|
摘要 红曲菌作为传统的药食同源微生物,可产生多种有益的代谢产物,如:红曲色素、洛伐他汀、γ-氨基丁酸等。构建基因工程菌是研究红曲菌代谢途径的有效方法,同源重组(HR)和非同源末端连接(NHEJ)被认为是丝状真菌DNA双链断裂(DSB)修复的两种主要途径。有研究表明,抑制NHEJ中关键成分的活性通常会提高目的基因的同源重组效率。我们在橙色红曲菌(Monascus aurantiacus)AS3.4384中发现了参与NHEJ途径的Ku70蛋白。通过农杆菌介导的同源重组法成功敲除Ku70基因,发现不影响红曲菌的生长繁殖产孢能力以及色素的生物合成,因此可构建Ku70基因缺失菌株作为红曲菌高效基因敲除体系,为后续的基因敲除提供研究材料。
|
|
关键词 :
橙色红曲菌,
Ku70基因,
同源重组,
基因敲除,
红曲色素
|
|
基金资助:国家自然科学基金资助项目(31860435,30860123); |
|
|
|