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螺旋藻中分析级藻蓝蛋白的高效制备 |
南昌大学食品科学与工程国家重点实验室生物质转化教育部工程研究中心 |
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摘要 为了低成本高效生产分析级藻蓝蛋白(C-Phycocyanin, C-PC),本文以钝顶螺旋藻藻粉为原料,采用超声耦合高压均质高效提取藻蓝蛋白,通过盐析、透析和葡聚糖凝胶柱G-75纯化所提取的藻蓝蛋白,从而使得藻蓝蛋白的纯度达到分析级,同时利用SDS-PAGE和紫外吸光度分析纯化提物中的成分变化。实验结果表明,高压均质耦合超声法可有效提高藻蓝蛋白的产率,其最佳组合提取条件为:390 W超声2 min,超声2 s/间隔2 s, 60 MPa处理3次,其粗提液中藻蓝蛋白产率和纯度(A620/A280)分别为131.2 mg·g-1和0.69,比单独高压均质和超声的产率分别提高了51.07%和58.15%,且高于先前报道的。粗提液经过两步铵盐析(12%硫酸铵和50%硫酸铵)和透析,藻蓝蛋白纯度可提升至1.09(>0.7),最后经过25 min葡聚糖凝胶G-75层析纯化得藻蓝蛋白产率和纯度(A620/A280)分别为107.65 mg·g-1和4.23(>4.0),达到分析级标准,其回收率达到82.05%,此外,分析级藻蓝蛋白的色度L*a*b*值分别为58.07,-15.44,-17.86,其主要与纯度、浓度及原料来源有关。采用SDS-PAGE凝胶电泳图分析藻蓝蛋白的分子量(17 kDa)及纯化效果,与先前报道的藻蓝蛋白分子量(15~21 kDa)基本一致。该研究结果为低成本高效生产分析级藻蓝蛋白提供技术支撑。
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关键词 :
螺旋藻,
藻蓝蛋白,
高压均质,
超声,
分离纯化
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基金资助:江西省博士后日常资助项目(2020RC08); |
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