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大鼠VDAC1腺病毒过表达载体构建及功能鉴定 |
赵嘉仪 袁明明 王利军 赖松青 邹华西 黄琼 刘季春 黄璜 |
南昌大学第一附属医院心脏大血管外科 南昌大学第一附属医院焕奎书院 |
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摘要 目的 构建电压依赖性阴离子通道蛋白1(VDAC1)腺病毒过表达载体,并观察其在H9C2细胞中的表达情况,为探究VDAC1在心肌细胞缺血再灌注损伤中的作用机制奠定基础。方法 构建ADV6-NC腺病毒及ADV6-VDAC1腺病毒,取第6代H9c2心肌样细胞用于转染。转染细胞分为3组:空白对照组、阴性对照组(转染ADV6-NC腺病毒)和实验组(转染ADV6-VDAC1腺病毒)。通过qPCR和蛋白免疫印迹实验检测各组细胞VDAC1的表达情况。结果 成功构建ADV6-NC及ADV6-VDAC1,实验组的VDAC1表达量明显高于空白对照组和阴性对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 利用腺病毒载体可使H9c2细胞在体外持续高效表达VDAC1。
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关键词 :
电压依赖性阴离子通道蛋白1,
肌细胞,
质粒构建,
腺病毒载体
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基金资助:江西省中医药管理局科技计划(2022A355); 南昌大学“四新”研究与改革实践项目(NCUJGLX-2022-160-130); 南昌大学创新创业教育类教学改革研究项目(NCUSCJG-2022N58); |
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