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抗幽门螺杆菌尿素酶B纳米抗体的制备及鉴定 |
钟引凤 刘晓芳 刘贝 黄云祥 何庆华 李燕萍 涂追 刘琼 付金衡 |
南昌大学生命科学学院 南昌大学中德联合研究院 南昌大学食品科学与技术国家重点实验室 南昌大学基础医学院 |
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摘要 制备抗幽门螺杆菌(Helicobacter pylori)尿素酶B(UreB)纳米抗体。用灭活的全幽门螺杆菌免疫羊驼,以重组蛋白UreB为靶分子,从噬菌体展示文库中筛选出能与重组蛋白UreB特异性结合的纳米抗体,构建原核表达载体,IPTG诱导表达,ELISA鉴定纳米抗体特异性。获得5×107cfu的噬菌体文库,将筛选的两个OD450值较高且序列不同的纳米抗体HU2-9和HU2-36分别进行表达SDS-PAGE鉴定均为可溶性且表达量分别为92和32 mg·L-1。ELISA结果表明两个纳米抗体能特异性结合Hp菌体蛋白,并对尿素酶活性具有一定的抑制作用。成功淘选出6种独特序列的抗幽门螺杆菌UreB纳米抗体。
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关键词 :
幽门螺杆菌,
噬菌体展示,
纳米抗体,
ELISA
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基金资助:国家自然科学基金资助项目(31471648); |
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