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促红细胞生成素对高糖环境下系膜细胞凋亡的影响及其可能机制 |
牟云鸿陈艳霞涂卫平房向东 |
南昌大学研究生院医学部南昌大学第二附属医院肾脏内科 |
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摘要 目的探究促红细胞生成素(EPO)在高糖环境下对正常人肾小球系膜细胞凋亡的影响及其可能机制,为延缓糖尿病肾病(DN)进展寻找新的治疗方法。方法体外培养正常人肾小球系膜细胞。将培养后的正常人肾小球系膜细胞随机分为8组:空白对照(A)组(未加任何刺激物),高糖(B)组(D-葡萄糖30 mmol·L-1),高渗(C)组(甘露醇25 mmol·L-1),EPO(D)组(EPO 20 U·mL-1),低浓度EPO干预(E)组(D-葡萄糖30 mmol·L-1+EPO 5 U·mL-1),中浓度EPO干预(F)组(D-葡萄糖30 mmol·L-1+EPO 10 U·mL-1),高浓度EPO干预(G)组(D-葡萄糖30mmol·L-1+EPO 20 U·mL-1),Y27632(H)组(D-葡萄糖30 mmol·L-1+Rho激酶抑制剂10μmol·L-1)。各组细胞均培养24 h。RT-PCR检测各组RhoA mRNA、ROCK1 mRNA的表达水平,流式细胞术检测各组的细胞凋亡。结果C、D、E 3组系膜细胞凋亡率与A组比较差异无统计学意义(P>0.05)。与B组比较,C、D、E、F、G 5组系膜细胞凋亡率、RhoA mRNA、ROCK1 mRNA表达水平均降低,H组系膜细胞凋亡率、ROCK1 mRNA表达水平均降低(均P<0.05);与E组比较,F、G、H 3组系膜细胞凋亡率均升高,RhoA mRNA、ROCK1 mRNA表达水平均降低(均P<0.05);与F组比较,G、H 2组系膜细胞凋亡率、ROCK1 mRNA表达水平均降低,G组RhoA mRNA表达水平降低、H组RhoA mRNA表达水平升高(均P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示,B组及E、F、G 3组RhoA mRNA表达与ROCK1 mRNA表达均呈正相关(r=0.829、0.898、0.831、0.861,均P<0.05)。结论 EPO可抑制高糖诱导的正常人肾小球系膜细胞的凋亡,其作用机制可能与阻断RhoA/ROCK信号通路有关。
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关键词 :
系膜细胞,
细胞凋亡,
RhoA mRNA表达,
ROCK1 mRNA表达,
作用机制;
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基金资助:国家自然科学基金(81460142); |
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