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TGF-β1、bFGF双基因修饰骨髓间充质干细胞的实验研究 |
戴芳宋莉朱德星邹源 |
南昌大学第二附属医院口腔科广州医科大学附属口腔医院口腔内科 |
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摘要 以脂质体为载体来介导转化生长因子-β1(TGF-β1)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)基因修饰骨髓间充质干细胞(BMSCs),观察两基因的表达情况。方法 对SD大鼠的BMSCs采用贴壁法联合Percoll密度梯度离心法获得。使用PCR技术获得TGF-β1基因、bFGF基因,将其基因在真核表达载体pcDNA3.1(+)上构建,再将两种真核表达载体通过脂质体转染至第3代BMSCs。采用RT-PCR、Western blot检测BMSCs中bFGF、TGF-β1基因的表达水平。结果 贴壁法联合Percoll密度梯度离心可以获得BMSCs。成功构建pcDNA3.1(+)-bFGF和pcDNA3.1(+)-TGF-β1真核表达载体后,将其转染BMSCs,RT-PCR、Western blot均可检测到bFGF、TGF-β1基因的表达。结论 bFGF和TGF-β1可以通过脂质体转染方式修饰BMSCs,并获得高效表达。
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