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转录因子Brachyury上调基质金属蛋白酶与促进肺癌细胞转移的机制研究 |
南昌大学第一附属医院骨科 |
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摘要 目的探究转录因子Brachyury上调基质金属蛋白酶(MMPs)与促进肺癌细胞转移的机制。方法建立Brachyury过表达和低表达的肺癌稳转细胞株,分析Brachyury转录因子对NSCLC细胞侵袭能力的影响;通过RT-PCR和real-time PCR技术比较23个MMPs的表达差异;原发性NSCLC组织标本免疫组织化学验证Brachyury与MMPs表达的关系。CHIP-PCR实验检测Brachyury对MMPs成员启动子是否存在调控位点。结果Brachyury转录因子能显著促进肺癌细胞的侵袭能力;Brachyury高表达的稳转细胞内MMP12、MMP24表达显著增加323%(P=0.02)、183%(P=0.40)。Brachyury低表达的稳转细胞内MMP7、MMP9、MMP10、MMP12和MMP19显著降低34%(P=0.09)、43%(P=0.08)、56%(P=0.07)、77%(P=0.002)和23%(P=0.04);且免疫组织化学进一步验证了Brachyury与MMPs的表达具有显著一致性。CHIP-PCR结果显示MMP12启动子区域(转录起始位点上游5′-266/-1443bp 3′)存在PCR显著扩增。结论多个基质金属蛋白酶的表达与转录因子Brachyury表达相关,MMP12可能与Brachyury的作用更加明显,这可能是Brachyury能促进NSCLC细胞转移的机制之一。
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关键词 :
非小细胞肺癌,
转录因子,
基质金属蛋白酶
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基金资助:江西省自然科学基金青年项目(20151BAB215001); |
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