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| 常染色体显性多囊肾病中泛素连接酶β-TrCP的表达及其作用和调控机制 |
| 陈美含； 陈揭剑； 陈旭娇； 周洁； 吴明； 杨明； 付莉莉； 宋书伟； 梅长林 |
| 第二军医大学附属上海长征医院肾内科； 中国人民解放军第一七五医院厦门大学附属东南医院肾脏病与血液净化科； |
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| CHEN Mei-han;CHEN Jie-jian;CHEN Xu-jiao;ZHOU Jie;WU Ming;YANG Ming;FU Li-li;SONG Shu-wei;MEI Chang-lin |
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摘要 目的观察常染色体显性多囊肾病(ADPKD)患者及动物模型中泛素连接酶β-TrCP的表达,初步探讨人囊肿衬里上皮OX161细胞中β-TrCP的作用和调控机制。方法在OX161细胞内转染β-TrCP的siRNA,采用蛋白免疫印迹法检测增殖细胞核抗原(PCNA)的表达,MTT比色法检测吸光度;在OX161细胞中抑制JAK2/STAT3通路或转染STAT3质粒,采用蛋白免疫印迹法检测JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3和β-TrCP的表达。收集ADPKD行肾脏切除术患者的肾脏组织和肾旁距癌组织5 cm以上的正常肾脏组织(正常对照组)、雄性Han:SPRD(cy/+)大鼠(ADPKD模型)和野生型Han:SPRD(+/+)大鼠肾组织(对照),均采用蛋白免疫印迹法检测β-TrCP的表达。收集Pkdlflox/flox;tamoxifen-Cre+小鼠(ADPKD模型)和Pkdlflox/flox;tamoxifen-Cre-小鼠(对照)肾组织,采用免疫组织化学法检测β-TrCP的表达和亚定位。结果与UCL93细胞相比,OX161细胞中JAK2/STAT3通路明显活化,β-TrCP表达量增加;β-TrCP敲减后细胞增殖减慢(P<0.05);WP1006抑制JAK2/STAT 3通路后,β-TrCP表达量减低,转染STAT 3质粒后,β-TrCP的表达量增加。与正常对照组、野生型Han:SPRD(+/+)大鼠及Pkdlflox/flox;tamoxifen-Cre-小鼠比较,ADPKD患者肾组织、Han:SPRD(Cy/+)大鼠肾组织及Pkdlflox/flox;tamoxifen-Cre+小鼠肾组织中β-TrCP表达量明显增加。结论在人囊肿衬里上皮OX161细胞株中β-TrCP表达量增多,且受JAK2/STAT3通路调控;在ADPKD患者及其模型鼠肾脏组织中β-TrCP表达量也增加。β-TrCP可能参与促进囊肿的发生和发展。
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| 关键词 ：
常染色体显性多囊肾病； 肾组织； 泛素连接酶&beta,
-TrCP； 细胞增殖； JAK2/STAT3通路； 动物,实验； 鼠
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| 基金资助: 国家自然科学基金(31371172) |
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2016, Vol. 56 
