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| 反枝苋花粉泛过敏原profilin基因的克隆表达、纯化及免疫学鉴定 |
| 谢水祥； 龚祥； 龚苗； 马莉； 肖小军； 刘志刚 |
| 赣南医学院病原生物学教研室； 南昌大学科学技术学院； 深圳大学过敏反应与免疫学研究所 |
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| XIE Shui-xiang;GONG Xiang;GONG Miao;MA Li;XIAO Xiao-jun;LIU Zhi-gang |
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摘要 目的克隆表达反枝苋花粉中泛变应原肌动蛋白抑制蛋白(profilin),并鉴定其免疫学活性。方法利用RT-PCR结合RACE技术克隆反枝苋花粉泛变应原profilin的全长基因,并进行序列分析。设计带有酶切位点的特异性引物,采用RT-PCR获得整个反枝苋花粉profilin的开放阅读框,将其与p ET28a载体连接并转化大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达,Ni2+亲和层析柱纯化重组蛋白,采用Western-blot检测其Ig E结合活性。结果 c DNA核苷酸测序表明反枝苋花粉profilin的全长基因由675个碱基组成,开放阅读框为399 bp,编码131个氨基酸。重组反枝苋花粉profilin在大肠杆菌中可溶性表达,进一步经Western-blot检测具有良好的Ig E结合活性。结论成功地克隆和表达了反枝苋花粉profilin,并具有良好的Ig E应答免疫活性。
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| 关键词 ：
反枝苋花粉,
抑制蛋白,
基因表达,
纯化
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| [1] |
田喜梅； 谢琼； 黄仁慧； 陶雪莹； 万翠香； 魏华. 植物乳杆菌谷氨酸脱氢酶基因在大肠杆菌中的表达[J]. 南昌大学学报（理科版）, 2016, 40(02): 182-. |
| [2] |
胡川； 姜伟； 单艳； 聂挺； 余勃； 陆豫. 微生物源α-L-鼠李糖苷酶制备橙皮素单葡萄糖苷[J]. 南昌大学学报（理科版）, 2016, 40(01): 60-. |
| [3] |
王媛媛； 林建立； 黄娜娜； 巴金戈； 刘志刚； 刘晓宇. 粉尘螨过敏原Der f 13基因克隆表达与免疫原性鉴定[J]. 南昌大学学报（医学版）, 2016, 56(01): 21-. |
| [4] |
梁瑞红； 袁敏； 李倩； 俸思洁； 刘成梅； 陈军； 刘继延. 大孔吸附树脂分离纯化南酸枣枣皮多酚的研究[J]. 南昌大学学报（工科版）, 2016, 38(01): 1-. |
| [5] |
刘卓琦； 卢洪飞； 杨晓红； 万慧芳； 余乐涵； 许宝华； 张霞丽； 万福生. Mst1对结直肠癌SW480细胞增殖与凋亡的影响[J]. 南昌大学学报（理科版）, 2015, 39(06): 606-. |
| [6] |
余乐涵； 万慧芳； 涂硕； 吴毓东； 朱伟锋； 熊明娣； 于新慧； 李华； 万福生. 大蒜素联合紫杉醇对人乳腺癌细胞增殖的影响及其机制[J]. 南昌大学学报（医学版）, 2015, 55(05): 26-. |
| [7] |
史浩；秦克旺；张磊；朱小春； . 基因芯片技术对先天性巨结肠症相关基因的筛选[J]. 南昌大学学报（医学版）, 2014, 54(07): 1-. |
| [8] |
罗联忠；陈仲巍；叶子坚； . 类人胰岛素原多拷贝重复基因原核表达载体的构建与表达[J]. 南昌大学学报（理科版）, 2014, 38(03): 234-. |
| [9] |
钟立鹏；姚敏；乐贞；黄春洪；. 基于Autodock和蛇PLIγ设计短肽sPLA2抑制剂[J]. 南昌大学学报（理科版）, 2013, 37(04): 401-. |
| [10] |
袁小惠；高安健；邬玉兰；刘志刚；. 粉尘螨Der f5克隆表达、纯化和免疫原性鉴定[J]. 南昌大学学报（医学版）, 2013, 53(02): 1-. |
| [11] |
刘蓉；张利蕾；范亚苇；胡蒋宁；李静；刘小如；邓泽元； . 茶渣中粗茶皂素的纯化及其抗氧化和抑菌活性[J]. 南昌大学学报（工科版）, 2013, 35(01): 17-. |
| [12] |
邓志云. GAP-43的研究进展及其与周围神经再生的关系[J]. 南昌大学学报（医学版）, 2012, 52(06): 94-. |
| [13] |
陈淼； 周凯. CIP2A与恶性肿瘤的关系及其表达调控的研究进展[J]. 南昌大学学报（医学版）, 2012, 52(05): 91-. |
| [14] |
周佳； 张国文； 胡明明. 大孔树脂分离纯化红旱莲黄酮[J]. 南昌大学学报（理科版）, 2012, 36(01): 82-85. |
| [15] |
李健; 徐积兄. RAGE基因与糖尿病慢性并发症[J]. 实用临床医学, 2011, 12(10): 1-. |
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2014, Vol. 54 