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摘要 目的构建Kiss-1重组质粒,探讨过表达Kiss-1对体外培养的小细胞肺癌NCI-H446细胞增殖的影响及其作用机制。方法构建p-EGFP-N2-kiss-1重组质粒,通过脂质体体外转染至NCI-H446细胞;根据转染情况分为3组:Control组(转染p-EGFP-N2空载体)、转染组(转染p-EGFP-N2-kiss-1重组质粒)及未转染组(空白对照)。West-ern blot检测经转染后的NCI-H446细胞中Kiss-1、mmp-9蛋白表达量的变化;流式细胞术检测Kiss-1蛋白对NCI-H446细胞增殖的影响。结果成功构建p-EGFP-N2-kiss-1重组质粒并转染至小细胞肺癌细胞NCI-H446;转染Kiss-1明显抑制了NCI-H446的增殖;Western blot示转染组细胞内的Kiss-1表达增加,mmp-9蛋白表达减少。结论过表达Kiss-1基因能抑制体外活化小细胞肺癌NCI-H446细胞的增殖;转染后细胞内mmp-9蛋白表达减少,推测其抗凋亡的作用可能是通过mmp-9产生的。
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关键词 :
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小细胞肺癌,
质粒构建,
Kiss-1,
mmp-9,
增殖
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基金资助: 江西省科技厅科技社会发展支撑计划(ZDS01000)
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